熒光成像的原理
作者: 來源: 日期:2022/8/3 14:56:44 人氣:3225
熒光是自然界常見的一種發(fā)光現(xiàn)象。熒光是光子與分子的相互作用產(chǎn)生的,這種相互過程可以通過雅布隆斯基(Jablonslc)分子能級圖描述:大多數(shù)分子在常態(tài)下,是處于基態(tài)的低振動能級So,當(dāng)受到能量(光能、電能、化學(xué)能等等)激發(fā)后,原子核周圍的電子從基態(tài)能級So躍遷到能量較高的激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)的電子處于高能量狀態(tài),不穩(wěn)定,會通過兩種途徑釋放能量回到基態(tài),一種是以光子形式釋放能量的輻射躍遷(包括熒光和磷光過程),一種是以熱能等形式釋放能量的非輻射躍遷。通常原子核外電子受到激發(fā)從基態(tài)So躍遷到激發(fā)態(tài)Si后,會通過非輻射躍遷的方式快速降落在低振動能級,隨后由低振動能級回到基態(tài),以光子輻射的形式釋放出能量,具有這種性質(zhì)的出射光稱為熒光。
熒光成像的理論基礎(chǔ)是熒光物質(zhì)被激發(fā)后所發(fā)射的熒光信號的強度在一定的范圍內(nèi)與熒光素的量成線性關(guān)系。熒光成像系統(tǒng)包括熒光信號激發(fā)系統(tǒng)(激發(fā)光源、光路傳輸組件)、熒光信號收集組件、信號檢測以及放大系統(tǒng)(CCD、PMT);